您的位置首页百科问答

如何计算质粒的拷贝数(copies)?

拷贝数计算公式:copies/ml(拷贝数)=(6.02 x 10(23)次拷贝数/摩尔) x (浓度) / (MW g/mol)。

细菌细胞中,某种特定质粒的数目。根据复制特性,质粒分严紧型和松弛型两类,前者在细胞中只含1~2个,而后者含10~15个以上。

恒定的拷贝数与质粒复制控制系统、宿主细胞遗传背景及生长条件有关。

质粒复制控制系统首先通过调节复制的起始点来控制拷贝数,调节因素包括阻遏蛋白、反义RNA和某些顺向重复序列。

有些质粒还有其他控制系统,如有分配迅弯功能的par系统和确保质粒稳定遗传的ccd系统。一旦质粒上与调控有关的基因或位点突变,可使拷贝数明显增加或减少。

如何计算质粒的拷贝数(copies)?

扩展资料

实时荧光定量PCR其定量的基本原理是在 PCR 反应体系中加入非特异性的荧光染料(如: SYBR GREEN I )或特异性的荧光探针(如: Taqman 探针)。

实时检测荧光量的变化,获得不同样品达到一定的荧光信号(阈值)时所需的循环次数: CT 值( Cycle Threshold );枣昌轿通过将已知浓度标准品的 CT 值与其浓度的对数绘制标准曲线,就可以准确定量样品的浓度。

荧光定量 PCR 技术具有简便、快捷的优点,能够有效扩增低拷贝的靶片段 DNA ,对每克样品中 20pg-10ng 的转基因成分进行有效凳肆检测。

同时,与 Southern 法相比,荧光定量 PCR 技术可对 T-DNA 的不同序列进行扩增,因此能实现对转基因品系中的基因重组的检测( Giovanna 2002 )。

参考资料来源:百度百科-拷贝数